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液相色譜儀發(fā)展的種種會將我們帶入一個色彩斑斕的世界

更新時間:2015-05-22點擊次數(shù):2645
 液相色譜儀發(fā)展的種種會將我們帶入一個色彩斑斕的世界
  液相色譜儀的系統(tǒng)由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。液相色譜儀儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進樣器進入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相) 內(nèi), 由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù), 在兩相中作相對運動時, 經(jīng)過反復多次的吸附- 解吸的分配過程, 各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別, 被分離成單個組分依次從柱內(nèi)流出, 液相色譜儀通過檢測器時, 樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來。
  液相色譜儀是目前應用zui多的色譜分析方法,液相色譜儀由流動相儲液體瓶、輸液泵、進樣器、色譜柱、檢測器和記錄器組成,其整體組成類似于氣相色譜,但是針對其流動相為液體的特點作出很多調(diào)整。HPLC的輸液泵要求輸液量恒定平穩(wěn);進樣系統(tǒng)要求進樣便利切換嚴密;由于液體流動相粘度遠遠高于氣體,為了減低柱壓液相色譜的色譜柱一般比較粗,長度也遠小于氣相色譜柱。HPLC應用非常廣泛,幾乎遍及定量定性分析的各個領域。
  使用液相色譜儀時,液體待檢測物被注入色譜柱,通過壓力在固定相中移動,由于被測物種不同物質(zhì)與固定相的相互作用不同,不同的物質(zhì)順序離開色譜柱,通過檢測器得到不同的峰信號,zui后通過分析比對這些信號來判斷待側(cè)物所含有的物質(zhì)。液相色譜作為一種重要的分析方法,液相色譜儀廣泛的應用于化學和生化分析中。液相色譜儀從原理上與經(jīng)典的液相色譜沒有本質(zhì)的差別,它的特點是采用了高壓輸液泵、高靈敏度檢測器和微粒固定相,適于分析高沸點不易揮發(fā)、分子量大、不同極性的有機化合物。
  液相色譜儀主要特點
  高壓——壓力可達150~300 kg/cm2。色譜柱每米降壓為75 kg/cm2以上。
  高速——流速為0.1~10.0 mL/min。
  ——塔板數(shù)可達5000/米。在一根柱中同時分離成份可達100種。
  高靈敏度——紫外檢測器靈敏度可達0.01ng。同時消耗樣品少。
  HPLC與經(jīng)典液相色譜相比有以下優(yōu)點:
  速度快——通常分析一個樣品在15~30 min,有些樣品甚至在5 min內(nèi)即可完成。
  分辨率高——可選擇固定相和流動相以達到*分離效果。
  靈敏度高——紫外檢測器可達0.01ng,熒光和電化學檢測器可達0.1pg。
  色譜柱可反復使用——用一根色譜柱可分離不同的化合物。
  樣品量少,容易回收——樣品經(jīng)過色譜柱后不被破壞,可以收集單一組分或做制備。
  液相色譜儀儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進樣器進入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相) 內(nèi), 液相色譜儀由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù), 在兩相中作相對運動時, 經(jīng)過反復多次的吸附- 解吸的分配過程, 各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別, 被分離成單個組分依次從柱內(nèi)流出, 通過檢測器時, 樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來。
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